冷凍保存細(xì)胞的方法：

冷凍保存細(xì)胞的方法一:冷凍管置于 4°C 30-0 分鐘→(-20°C30 分鐘*)→-80°C16~18 小時(shí)(或隔夜)→液氮槽 vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存細(xì)胞的方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降 1-3°C 至–80°C 以下，再放入液氮槽 vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20°C 不可超過 1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80°C 冰箱中，存活率稍微降低一些。

細(xì)胞欲冷凍保存時(shí)，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？

冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為 1x106cells/mlvial，融合瘤細(xì)胞則以 5x106cells/mlvial 為宜。

冷凍管應(yīng)如何解凍？

 取出冷凍管后，須立即放入 37°C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意**，預(yù)防冷凍管之爆裂。