沒空吹，實(shí)驗(yàn)上見。專心做好抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤ATCC菌株，上海**生物來了。

抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤ATCC菌株【購買指南】

由于現(xiàn)在國內(nèi)的細(xì)胞庫資料不是很充足，而且比較零散，包括建株時(shí)的技術(shù)層面不一，沒有比較嚴(yán)格統(tǒng)一的操作規(guī)范，所以在遇到比較重要的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)，一般都比較傾向于購買國外的細(xì)胞株，但購買國外細(xì)胞株需要考慮的因素有如下幾點(diǎn)：

1、細(xì)胞株的生物等級，由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。

2、在購買國外細(xì)胞株時(shí)，需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。

3、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料，以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡，甚至于被退回給發(fā)貨人。

抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤ATCC菌株【運(yùn)輸說明】

細(xì)胞運(yùn)輸中，還要注意細(xì)胞株的反復(fù)凍融情況，有的供應(yīng)商在供應(yīng)細(xì)胞株或者培養(yǎng)基時(shí)，特別是需要低溫保存的培養(yǎng)基時(shí)，通常會出現(xiàn)運(yùn)輸溫度與儲存溫度的差別，而導(dǎo)致培養(yǎng)基或細(xì)胞株融掉后又放進(jìn)低溫冰箱進(jìn)行凍存，然后再快遞給我們，特別是血清類制品，如果在接到培養(yǎng)基并解凍后，沉淀和絮狀物較多時(shí)，那就要懷疑是否是這種情況!

對于所買回來的細(xì)胞簽別，除了顯微鏡下的形態(tài)學(xué)觀察，還有就是特異性實(shí)驗(yàn)，這也是比較重要的!細(xì)胞株有些時(shí)候復(fù)蘇后剛培養(yǎng)的時(shí)候，老師們發(fā)現(xiàn)從形態(tài)上判斷似乎不是自己所需要的細(xì)胞株，于是我就建議他做細(xì)胞屬性的特異性實(shí)驗(yàn)，ATCC的技術(shù)資料*后面附有細(xì)胞株的代數(shù)，以及細(xì)胞株經(jīng)過了哪些檢測，細(xì)胞株特異性實(shí)驗(yàn)的方法，從而用以確認(rèn)真正是自己所需要的細(xì)胞株!凍存的細(xì)胞株，特別是從國外進(jìn)口的細(xì)胞株，應(yīng)該立即復(fù)蘇，盡量不要再凍存，反復(fù)凍融會導(dǎo)致細(xì)胞株復(fù)蘇后的活性低!**次接種培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)以進(jìn)口的25平方厘米的培養(yǎng)瓶為佳，現(xiàn)在市面上的主要有orange,cornig,BD(Falcon),其中orange價(jià)格比較公道5-6元/個(gè)，BD(Falcon)*貴10元左右每個(gè)，BD的產(chǎn)品一般用于醫(yī)院生殖中心實(shí)驗(yàn)室人工受精卵的一到三代培養(yǎng)。ATCC的細(xì)胞株培養(yǎng)基分為完全培養(yǎng)基(原代培養(yǎng))，次培養(yǎng)基(傳代培養(yǎng)基)，請大家要注意!

如果細(xì)胞運(yùn)來后，應(yīng)該馬上進(jìn)行復(fù)蘇，復(fù)蘇時(shí)，迅速投入37攝氏度水浴中并不斷振搖，使之迅速融化，離心應(yīng)在1000轉(zhuǎn)/分以下，如果太高速會使本來脆弱的細(xì)胞產(chǎn)生較多的碎片，培養(yǎng)過程中，甚至?xí)驗(yàn)樗槠霈F(xiàn)黑點(diǎn)(一般都是800r/min,5min)，棄上清液，以去除二甲基亞砜。加入先前配好的培養(yǎng)基，并在50ml培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。

抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤ATCC菌株【熱賣細(xì)胞】

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抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤ATCC菌株【實(shí)驗(yàn)方法】

IHC全攻略5：對照的重要性

適當(dāng)?shù)膶φ諏τ贗HC/ICC 結(jié)果的準(zhǔn)確闡釋至關(guān)重要。令人滿意的IHC/ICC實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可產(chǎn)生結(jié)果，說明抗原位于正確的組織、細(xì)胞類型或亞細(xì)胞定位。固定、封閉、抗體孵育和抗原修復(fù) 步驟的優(yōu)化將產(chǎn)生強(qiáng)烈而特異的信號。然而，有時(shí)實(shí)驗(yàn)也會出現(xiàn)假象哦，蒙蔽了你的雙眼。因此，IHC/ICC實(shí)驗(yàn)必須包含陽性和陰性對照。

此外，抗體特異性、實(shí)驗(yàn)條件、組織類型之間生物學(xué)條件、甚至研究人員的差異都可能產(chǎn)生不一致的染色，導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)論。為了實(shí)現(xiàn)性能一致，詳細(xì)記錄是IHC/ICC研究的一個(gè)重要因素。在此，我們介紹了一些公認(rèn)的對照，可支持您IHC/ICC結(jié)果的特異性。

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